Thèse Développement de Fragments d'Anticorps Présentant des Effets Modulateurs Allostériques sur les Récepteurs Fsh des Animaux de Rente Afin de Contrôler leur Reproduction sans Hormone Exogène H/F - Doctorat.Gouv.Fr

Établissement : Université de Tours École doctorale : Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant - SSBCV Laboratoire de recherche : PRC - Physiologie de la Reproduction et des Comportements Direction de la thèse : Eric REITER ORCID 0000000246317439 Début de la thèse : 2026-10-01 Date limite de candidature : 2026-04-27T23:59:59 La reproduction des animaux de rente repose sur l'utilisation d'hormones exogènes qui soulève des enjeux environnementaux, économiques et éthiques. Le récepteur de la FSH (RFSH), une cible validée, manque à ce jour d'outils pharmacologiques spécifiques en élevage. Notre équipe a récemment développé les premiers nanobodies (VHH) capables de se lier au RFSH humain et murin, modulant leur activité de façon allostérique, qui ont montré une efficacité in vitro et un effet in vivo sur la fertilité de souris femelles. L'objectif de cette thèse est de développer des VHHs pour moduler la reproduction chez des espèces de rente. Les approches développées incluront : i) caractérisation de VHHs déjà existants ; ii) sélection de VHHs spécifiques des espèces cibles ; iii) analyse mécanistique par modélisation moléculaire ; iv) validation sur cellules de primaire et in vivo chez la poule et la brebis. Le projet sera organisé en plusieurs tâches :
1) Identification de VHH reconnaissant les RFSH des espèces cibles.
Deux approches complémentaires seront mises en oeuvre : a) Recherche de réactivité croisée : les VHH anti-RFSH humains déjà existants dans l'équipe seront testés sur les RFSH des espèces cibles (cytométrie en flux et complémentation de luciférase-NanoBiT) ; leur effet sur la signalisation des récepteurs de ces espèces sera évalué par BRET (AMPc, recrutement protéines G, -arrestines). b) Sélection espèce-spécifique par phage-display : la librairie synthétique de VHH développée dans l'équipe sera criblée contre les RFSH bovin, ovin, caprin, porcin et de poule, exprimés en cellules HEK293. Le séquençage haut débit permettra d'identifier les candidats enrichis. Les VHH sélectionnés seront produits et caractérisés (liaison, spécificité, cinétique, signalisation).
2) Analyses structure-activité.
Grâce à la structure cryo-EM d'un complexe FSHR/VHH récemment résolue en collaboration, des approches in silico (modèles par homologie, alignements multiples, outils de docking open-source, etc) permettront de prédire les interfaces d'interaction et de comparer les déterminants structuraux entre espèces. Des expériences de validation (NanoBiT, mutagenèse dirigée) seront mises en oeuvre (4).
3) Validation sur cellules primaires.
Les VHHs retenus seront testés sur cellules de granulosa primaires de brebis et de poule (AMPc, stéroïdogenèse, prolifération), en collaboration avec l'équipe SENSOR de la PRC.
4) Reformatage des VHH.
Afin d'augmenter la demi-vie in vivo, les meilleurs VHH seront reformatés en VHH-Fc adaptés à l'espèce (Fc d'immunoglobine ovine ou aviaire), produits en cellules eucaryotes et validés in vitro.
5) Preuve de concept chez la poule (collab. UMR BOA et UE-PEAT).
6) Preuve de concept chez la brebis (collab. UE-PEAO).
L'objectif principal est de déterminer si des VHHs anti-RFSH peuvent moduler la reproduction des espèces de rente par modulation allostérique. La comparaison multi-espèce permettra également d'approfondir la compréhension structurale des mécanismes d'action. Dans ce but, nous analyserons les réactions croisées entre espèces et utiliserons la modélisation moléculaire pour identifier les régions extracellulaires impliquées dans l'interaction VHH-RFSH. Compte tenu de la conservation structurale du domaine extracellulaire du RFSH, nous chercherons à identifier : i) des VHHs actifs sur plusieurs espèces d'intérêt ; ii) des modulateurs allostériques négatifs permettant une synchronisation des cycles sans progestagènes ; iii) des modulateurs allostériques positifs pouvant induire l'ovulation ou la superovulation.

Titulaire d'un master 2 dans un des domaines suivants : reproduction, biologie cellulaire et signalisation, agronomie, bio-ingénierie, pharmacologie moléculaire. Maîtrise écrite et orale de l'anglais. Forte motivation et investissement personnel. Aptitude et goût pour le travail collectif.